亲子鉴定就是利用医学、遗传学的理论和技术,通过子代和亲代遗传标记的比对,分析遗传特征,判断父母与子女之间是否有亲生关系。一般DNA亲子鉴定的采样有血液、带毛囊的头发、羊水及人体组织细胞如口腔粘膜细胞等几种。
下面小编就来讲讲亲子鉴定的实验步骤和实验的试剂来详细讲讲。
第一步:采血提取DNA
本次实验以采集血样进行DNA鉴定。
实验人员把采集的血液置于含抗凝剂的1.5毫升离心管中。接下来在PCR实验室DNA提取间,实验人员取少许血液,在其中加入DNA提取液。广东司法亲子鉴定中心杨主任表示,之所以加入提取液是为了将细胞中的DNA提取出来,去除其他物质,这样能够更好地进行检测。
第二步:扩增DNA
当DNA提取完成后,实验人员再取出DNA检测试剂盒,在无菌超净台内加样,实验人员的双手在超净台内操作,确保实验在一个相对安全、无菌的环境下进行。
实验人员在新的试管中加入了2微升的DNA,2微升的蒸馏水,6微升的亲子鉴定试剂,据了解,亲子鉴定试剂里面包括酶、引物等试剂,加入了所有的试剂后,实验人员把试剂在混匀器上混匀,让试剂和DNA样本能够充分混合。广东司法亲子鉴定中心杨主任解释到,虽然之前提取了一些DNA,但并不全是我们需要的靶基因,量也不多。为此,第二步要在PCR扩增间进行扩增,就是通过引物扩增人体DNA上的靶基因,直到达到所需的量为止。
实验人员把小试管放入扩增仪中,通过变性、退火、复性的循环,靶基因得到循环往复的复制,从而扩增出我们所需的靶基因数量,以便之后的操作。
第三步:电泳比对位点
经过3小时的扩增,实验人员把试管取出,冷却后,开始最后一个环节--电泳。实验人员把DNA产物和电泳试剂混合后放入一个叫做3130荧光自动测序仪当中进行检测。广东司法亲子鉴定中心杨主任表示,这个仪器将会自动从试管中提取DNA产物,然后进行电泳,根据DNA片断的长短和不同颜色荧光进行21个位点DNA分析。
结果终于出来了,实验人员在做最后的结果比对,分析结果计算概率,然后进行最后的结论。电脑上显示,有多组荧光DNA峰,像心电图一样,广东司法亲子鉴定中心杨主任告诉记者,现在看到的就是位点的比对,这个位点就是这个凸起来的高峰和子女的这个正好对上,以此类推,就能算出多少个位点对上,当然这个还需要工作人员的概率计算。
以上就是广东司法亲子鉴定中心为您介绍的亲子鉴定的实验步骤和实验室试剂,如果还有其他关于亲子鉴定的问题可以随时联系在线客服。